您的位置: 首页 > 技术文章 > 定量PCR仪的分析方法及技术概述

定量PCR仪的分析方法及技术概述

发布时间:2022-05-12浏览:246次

实时荧光定量PCR仪技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。  
1.Ct值的定义  
在荧光定量PCR技术中,有一个很重要的概念--Ct值。C代表Cycle,t代表threshold(阈值,临界值),Ct值的含义是:每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。  
2.荧光阈值的设定  
PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光阈值的缺省设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍,即:threshold=10′SDcycle3-15  
3.Ct值与起始模板的关系  
研究表明,每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代Ct值。因此,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。  
 

 

Contact Us
  • QQ:67831998
  • 邮箱:67831998@qq.com
  • 传真:010-63862350
  • 地址:北京市丰台区科学城海鹰路9号综合楼9-9幢3层

扫一扫  微信咨询

©2022 北京海洋蓝天科技发展有限公司 版权所有    备案号:京ICP备18008742号-2    技术支持:化工仪器网    Sitemap.xml    总访问量:21848    管理登陆