您的位置: 首页 > 技术文章 > 二手GE蛋白纯化系统的常见问题总结

二手GE蛋白纯化系统的常见问题总结

发布时间:2022-07-21浏览:83次

  二手GE蛋白纯化系统是一种用于生物学、基础医学、临床医学、预防医学与公共卫生学领域的工艺试验仪器,可以快速完成纯化生物分子蛋白质、核酸、肽等,完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。进行生物大分子的范例纯化,已知和未知蛋白质的纯化,蛋白质的结构动力学药物作用靶点研究,药物蛋白的分离,蛋白质工程药物的合成,蛋白质的定性,组织细胞中各种蛋白质在生物体中如何发展功能,基因表达产物的分离。检测、分离、纯化多种生物样品,有效地针对各种样品:植物、动物、人类生物体,检测、纯化、分离特异性生物小分子。
 
  二手GE蛋白纯化系统的常见问题总结:
 
  1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。
 
  请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助溶剂提取后,可以用GST做亲和层析,但效率只有50%~60%左右。洗脱完融合蛋白不需要助溶剂,但这样的条件下切割完后目的蛋白会沉淀,我用0.5%CHAPS助溶可勉强溶解部分,目的蛋白疏水性比较强。
 
  2)请问有没有合成过配体为FMN的亲和胶?
 
  亲和的填料合成过20来种,你是希望用它来纯化某种脱氢酶吗,我看FMN可偶联的有限,倒是FAD有活泼的氨基好偶联,何况它们几乎是同一个辅酶,你是不是考虑把FAD连上去。当然FMN的结构上也有个仲胺,可以偶联到带长手臂的环氧活化的填料上,而溴化氰活化或别的活化的介质都不大好,因此我觉得这个没有什么问题。

 

Contact Us
  • QQ:67831998
  • 邮箱:67831998@qq.com
  • 传真:010-63862350
  • 地址:北京市丰台区科学城海鹰路9号综合楼9-9幢3层

扫一扫  微信咨询

©2022 北京海洋蓝天科技发展有限公司 版权所有    备案号:京ICP备18008742号-2    技术支持:化工仪器网    Sitemap.xml    总访问量:21587    管理登陆